Na explantáciu je potrebné použiť rastlinné tkanivá v primárnej štruktúre; na to, aby sa mohli ľahko reprodukovať, je dôležité, aby išlo o mladé tkanivá, prípadne s náznakmi meristematického tkaniva. Inými slovami, je nevyhnutné, aby tieto explantované tkanivá boli životne dôležité.
Pri určitých druhoch existujú biotechnologické preferencie pri výbere najvhodnejšieho explantátu pre genézu rastliny in vitro; napríklad koreň koreňa sa používa na biotechnologické pestovanie mrkvy.
Typ použitého explantátu tiež ovplyvňuje viac -menej zastavený rast kalusu; odôvodnený výber typu explantátu preto umožňuje efektívnejšiu biotechnologickú kultúru.
Vytvorenie uzavretého systému, ktorý umožňuje podmienený rast kultúry in vitro.
Bunky explantátu majú špecifickú tkanivovú charakterizáciu, a preto musia byť kondicionované, aby stratili túto diferenciáciu a rozdelili sa nediferencovane. Preto je dôležité prijať adekvátne kultivačné médium. Kultivačné médium je v zásade vývar bohatý na výživové prvky, ako je sacharóza, jednoduché a komplexné soli. Kultivačné médium musí nasmerovať energetický výdaj nediferencovaných buniek na cestu sekundárneho metabolizmu; na to je v laboratóriu systém umiestnený v tme, čím sa zabráni tomu, aby rastlinná bunka spotrebovala svoje energetické rezervy na uskutočnenie fotosyntézy; ak dôjde k fotosyntéze, často to nestačí na splnenie energetických potrieb kultúry in vitro.
Medzi pôdnymi zložkami nachádzame kyselinu indolactovú, jeden z rastlinných hormónov zodpovedných za špecifický morfologický a fyziologický vývoj bunky; malé koncentrácie týchto molekúl určujú veľké zmeny v metabolizme a morfogenéze bunky alebo rastlinného tkaniva. Preto prítomnosť rastlinných hormónov v kultivačnom bujóne hrá zásadnú úlohu pri strate charakterizácie tkaniva explantátových buniek, aby sa vytvorili totipotentné bunky, ktoré je možné nasmerovať na najproduktívnejší metabolizmus. Zložky kultivačného média sú nástrojmi že technológ sa môže líšiť, aby získal konkrétny biotechnologický produkt.
Ďalšou charakteristikou kultivačného média je kyslé pH.
Základom tohto odvetvia biotechnológie je fyziológia rastlín, tj. Štúdia fungovania rastlinnej bunky; ak je známa, fyziológia rastlín dáva biotechnológovi základné predstavy o výživových látkach zapojených do bunkového metabolizmu. Výber výživových látok v bunková pôda je výsledkom mnohých skúseností a pokusov na kvalitatívnom základe. Experimentálne dôkazy potvrdzujú skutočné a nevyhnutné potreby rastlinných buniek in vitro; kvalitatívny problém sa však pridáva aj ku kvantitatívnemu: koncentrácie látok použité sú v skutočnosti rovnako dôležité pre správny rast.
Pre rôzne druhy je možné použiť rovnaké živiny, ale v rôznych koncentráciách alebo rôznych zložkách. Je tiež možné, že kultúry explantátov in vitro pochádzajúce z tej istej rastliny majú rôzne funkčné a biotechnologické charakteristiky; v závislosti od typu použitého explantátu sa metabolity, ktoré je možné získať, tiež menia vo vzťahu k odlišnému manažmentu kultivačného média. Je však zrejmé, že na to, aby sa plodina čo najlepšie obhospodarovala, je potrebné podrobne poznať metabolické cesty rastlinnej bunky explantátu, aby bolo možné ich zapnúť alebo vypnúť pomocou Nediferencovaná bunka in vitro sa môže tiež exprimovať metabolicky iným spôsobom, ako by sa vyjadrovala v prirodzene pestovanom tkanive.
Existujú vopred zabalené kultivačné médiá, ktoré uľahčujú prvé kroky pasážovania kultúry in vitro; tieto pôdy je možné modifikovať podľa typu explantátu, druhu a výsledku, ktorý chceme dosiahnuť. Aby sa kalus stal z biotechnologického hľadiska produktívnym prvkom, je potrebné preniesť časť bunkového materiálu do miešaného kvapalného média. Na tomto mieste je potrebné vyhodnotiť, ako postupovať podľa účelu: agronomické zlepšenie, biotransformácia, biomasa alebo výroba účinných látok.
Ďalšie články o "Biotechnológii: výber" explantátu a kultivačného média "
- Biotechnológie
- Farmakognózia
- Biotechnológia: koncept biotransformácie a biomasy
